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產品中心

  • Y2HGold菌株

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW-CC3485
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
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細胞基本信息

Y2HGold菌株

TW-CC3485

通蔚生物

細胞規格

100μl

抗性

無抗

培養基

YPDA

菌株類別

酵母菌

培養條件

28℃,有氧,YPDA

基因型

MATa,trp1-901,leu2-3,112,ura3-52,his3-200,gal4Δ,gal80Δ,LYS2::

GAL1UAS–Gal1TATA–His3,GAL2UAS–Gal2TATA–Ade2URA3: :

MEL1UAS–Mel1TATAAUR1-C MEL1

質粒轉化

電轉

保存方式

30%甘油,-20℃

基本應用

用于酵母雙雜交

菌株簡介

Y2HGold菌株是Clontech公司開發的GAL4系統酵母雙雜實驗用菌株,MATa型,可直接轉化質粒或與MATα型酵母菌株Y187通過mating操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation  marker為: trp1, leu2,報告基因為:AbAr, HIS3, ADE2, MEL1。Y2HGold -GAL4酵母雙雜系統需要兩種質粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。質粒PGBKT7的篩選標志為TRP1,用于表達DNA-BD(來自酵母轉錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白;質粒PGADT7的篩選標志為LEU,用于表達AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4系統原理:一個完整的酵母轉錄因子GAL4可分為功能上相互獨立的兩個結構域:位于N端1 ~ 174位氨基酸區段的DNA結合域(DNA-BD)和位于C端768 ~881 位氨基酸區段的轉錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并與之結合。而AD可以啟動UAS下游的基因進行轉錄。BD和AD單獨存在不能激活轉錄,但當二者接近時,則呈現完整的GAL4活性,使含有UAS的啟動子下游基因轉錄表達。正常條件下,BD不與AD結合,將要檢測的蛋白質分別與BD和AD融合,形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和 prey 融合蛋白(prey-AD),如果 bait 和 prey發生相互作用,就會促使 BD 和 AD 的相互接近,形成完整的GAL4,從而激活報告基因的轉錄。Y2HGold有四個報告基因:AbAr, HIS3, ADE2, MEL1,分別由三種不同的啟動子(G1,G2,M1)啟動,這三種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區相同,其余部分均不同,大大降低了酵母雙雜假陽性發生的概率。此外新報告基因AbAr與以前的營養缺陷報告基因相比具有更低背景的優點,也可以降低酵母雙雜假陽性發生的概率。

供應范圍

僅供限于科研實驗研究

運輸方式

低溫快遞運輸

菌株優勢

通蔚生物菌株庫擁有200種菌株 , 遺傳性狀一致

特別說明

細胞購買/細胞培養/動物血清/實驗服務/原代提取/菌株購買,請立即與通蔚生物聯系

售后服務

細胞予重發

1.細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發。

2.收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發

3.收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發

4.常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發

5.常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,出現污染,經核實后,重發

6.細胞活性問題,請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發

細胞不予重發

1.客戶操作造成細胞污染,不重發

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發

3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發

4.細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片,不重發

5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發

6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發

特別說明

上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833/15800441009,我們隨時給予實驗中的免費解答。

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